一、PCR實驗室四(si)要素

1、試劑準備區

         用于試(shi)(shi)(shi)(shi)驗試(shi)(shi)(shi)(shi)劑(ji)(ji)(ji)(ji)的(de)準(zhun)(zhun)(zhun)備(bei)(bei)(bei)。該區(qu)域為(wei)正壓，目(mu)的(de)是防止污染物質(zhi)溢入。該區(qu)域內部(bu)又可分為(wei)3個區(qu)域：普通提(ti)取試(shi)(shi)(shi)(shi)劑(ji)(ji)(ji)(ji)的(de)準(zhun)(zhun)(zhun)備(bei)(bei)(bei)區(qu)、PCR試(shi)(shi)(shi)(shi)劑(ji)(ji)(ji)(ji)準(zhun)(zhun)(zhun)備(bei)(bei)(bei)區(qu)和(he)PCR主(zhu)反應(ying)液(ye)(ye)準(zhun)(zhun)(zhun)備(bei)(bei)(bei)區(qu)。在普通提(ti)取試(shi)(shi)(shi)(shi)劑(ji)(ji)(ji)(ji)的(de)準(zhun)(zhun)(zhun)備(bei)(bei)(bei)區(qu)內準(zhun)(zhun)(zhun)備(bei)(bei)(bei)一些(xie)樣(yang)(yang)品核(he)酸提(ti)取時所需的(de)裂解(jie)液(ye)(ye)、提(ti)取液(ye)(ye)等；PCR試(shi)(shi)(shi)(shi)劑(ji)(ji)(ji)(ji)準(zhun)(zhun)(zhun)備(bei)(bei)(bei)區(qu)用于PCR試(shi)(shi)(shi)(shi)劑(ji)(ji)(ji)(ji)的(de)制備(bei)(bei)(bei)和(he)保存(cun)。例如準(zhun)(zhun)(zhun)備(bei)(bei)(bei)引物、探針等PCR試(shi)(shi)(shi)(shi)劑(ji)(ji)(ji)(ji)。為(wei)了(le)防止交叉污染，避(bi)免反復冷凍和(he)解(jie)凍，試(shi)(shi)(shi)(shi)劑(ji)(ji)(ji)(ji)存(cun)貯溶(rong)液(ye)(ye)應(ying)該被平均為(wei)小(xiao)的(de)工作(zuo)體積，儲存(cun)在這個房間以備(bei)(bei)(bei)后用：PCR主(zhu)反應(ying)液(ye)(ye)準(zhun)(zhun)(zhun)備(bei)(bei)(bei)區(qu)將(jiang)進(jin)行(xing)主(zhu)反應(ying)混合液(ye)(ye)(除了(le)樣(yang)(yang)品。所有PCR所需試(shi)(shi)(shi)(shi)劑(ji)(ji)(ji)(ji)的(de)混合)添加到PCR管的(de)操作(zuo)。重(zhong)要提(ti)示：不能將(jiang)其它房間的(de)材料(包括擴增、模板(ban)和(he)目(mu)標核(he)酸或陽性對照、供應(ying)品、或設備(bei)(bei)(bei))帶進(jin)試(shi)(shi)(shi)(shi)劑(ji)(ji)(ji)(ji)準(zhun)(zhun)(zhun)備(bei)(bei)(bei)區(qu)。

2、樣品準備區

         該區(qu)域(yu)無壓力設(she)置要求。該區(qu)域(yu)是用(yong)(yong)于(yu)(yu)對(dui)樣(yang)(yang)品進(jin)(jin)行(xing)分(fen)樣(yang)(yang)，將樣(yang)(yang)品進(jin)(jin)行(xing)研磨(mo)、粉(fen)碎(sui)、勻漿的(de)(de)(de)區(qu)域(yu)。由于(yu)(yu)在(zai)(zai)(zai)這些粉(fen)碎(sui)、研磨(mo)和(he)勻漿處(chu)理過程中會(hui)產(chan)生氣溶(rong)膠，因此，存在(zai)(zai)(zai)陽性(xing)樣(yang)(yang)品污染后(hou)續操作的(de)(de)(de)可(ke)能性(xing)。該區(qu)域(yu)與后(hou)面(mian)的(de)(de)(de)區(qu)域(yu)應嚴格(ge)隔(ge)離，應放(fang)在(zai)(zai)(zai)與后(hou)面(mian)的(de)(de)(de)三個區(qu)域(yu)隔(ge)開(kai)的(de)(de)(de)獨立的(de)(de)(de)房間(jian)中。在(zai)(zai)(zai)樣(yang)(yang)品準備區(qu)內還可(ke)設(she)立一個專用(yong)(yong)的(de)(de)(de)封閉區(qu)或房間(jian)用(yong)(yong)于(yu)(yu)樣(yang)(yang)品的(de)(de)(de)接收(shou)和(he)儲(chu)存。這個房間(jian)可(ke)以放(fang)置冰箱(xiang)用(yong)(yong)于(yu)(yu)樣(yang)(yang)品儲(chu)存，應該和(he)樣(yang)(yang)品準備區(qu)其(qi)它(ta)區(qu)域(yu)隔(ge)離開(kai)。樣(yang)(yang)品準備區(qu)域(yu)的(de)(de)(de)人(ren)員不得進(jin)(jin)入試(shi)劑(ji)準備區(qu)。

3、核酸提取區

         核(he)酸(suan)提(ti)取(qu)區是進行(xing)樣(yang)品(pin)核(he)酸(suan)提(ti)取(qu)的(de)(de)(de)區域(yu)(yu)(yu)。該(gai)區域(yu)(yu)(yu)為負壓，目(mu)的(de)(de)(de)是防止核(he)酸(suan)溢出(chu)造成污(wu)染(ran)(ran)。樣(yang)品(pin)準備(bei)區又包(bao)括從(cong)樣(yang)品(pin)中(zhong)進行(xing)核(he)酸(suan)提(ti)取(qu)和(he)純化的(de)(de)(de)區域(yu)(yu)(yu)以(yi)(yi)及將核(he)酸(suan)加(jia)(jia)到包(bao)含(han)PCR主(zhu)反應混合液(ye)管(guan)(guan)中(zhong)的(de)(de)(de)操作(zuo)區域(yu)(yu)(yu)。添加(jia)(jia)完樣(yang)品(pin)后(hou)，PCR管(guan)(guan)的(de)(de)(de)蓋子要盡可能(neng)快地蓋好(hao)。使用PCR板和(he)膠(jiao)蓋時，陽(yang)性對(dui)照和(he)含(han)目(mu)標(biao)序列的(de)(de)(de)樣(yang)品(pin)要與(yu)待測樣(yang)本(ben)分開(kai)操作(zuo)，以(yi)(yi)避免模板添加(jia)(jia)時造成交叉(cha)污(wu)染(ran)(ran)

4、擴(kuo)增(zeng)和產品(pin)檢測區

         該(gai)(gai)區(qu)域(yu)(yu)是(shi)用來進行PCR擴增和PCR分(fen)析的(de)。PER儀放置(zhi)(zhi)在(zai)(zai)這個區(qu)域(yu)(yu)。房(fang)間(jian)(jian)保持負(fu)壓，目(mu)的(de)是(shi)防止核酸(suan)溢出。在(zai)(zai)該(gai)(gai)區(qu)域(yu)(yu)人員一定要一直穿戴工作服和手套，在(zai)(zai)離開房(fang)間(jian)(jian)前脫(tuo)去，防止擴增子污(wu)染其它地點。所有用于擴增和產品檢(jian)測的(de)設(she)備要用于這個房(fang)間(jian)(jian)。PCR分(fen)析]二作也設(she)置(zhi)(zhi)在(zai)(zai)該(gai)(gai)區(qu)域(yu)(yu)，例如：酶切(qie)、測序(xu)、克隆等，但實(shi)驗室應盡可能把這些(xie)活動分(fen)隔在(zai)(zai)不同(tong)區(qu)域(yu)(yu)或不同(tong)房(fang)間(jian)(jian)。以(yi)降低擴增產物的(de)污(wu)染風(feng)險。如果沒有條件在(zai)(zai)該(gai)(gai)區(qu)域(yu)(yu)設(she)立負(fu)壓，此區(qu)域(yu)(yu)必須建(jian)立排風(feng)裝置(zhi)(zhi)。

二、PCR實(shi)驗室(shi)的功能分區(qu)

1、基因擴(kuo)增實驗室的設計通常(chang)有(you)(you)四大(da)分區(qu)(qu)：試劑儲存和(he)準備(bei)區(qu)(qu)、標本制備(bei)區(qu)(qu)、核算(suan)擴(kuo)增區(qu)(qu)、產物分析(xi)區(qu)(qu)。這四個分區(qu)(qu)原本就不(bu)需要連接在(zai)(zai)一起，且在(zai)(zai)物理空(kong)間上(shang)必(bi)須是獨立的，各(ge)區(qu)(qu)域無論在(zai)(zai)空(kong)間上(shang)還是在(zai)(zai)使(shi)用中，應處于的分隔狀(zhuang)態，不(bu)能(neng)有(you)(you)空(kong)氣(qi)的直(zhi)接相通。

2、PCR實(shi)驗室的功(gong)能區(qu)分(fen)布：

① 基因擴增實驗室的用房分(fen)(fen)區(qu)可分(fen)(fen)散布置(zhi)(zhi)，可集中(zhong)布置(zhi)(zhi)；集中(zhong)布置(zhi)(zhi)的分(fen)(fen)布原則(ze)是依次排列、獨(du)立分(fen)(fen)區(qu)；4個基本分(fen)(fen)區(qu)可根據需(xu)要進行遞增/減。如下為PCR實驗室功能(neng)分(fen)(fen)區(qu)的常見布局

② 建(jian)筑上，緩沖間是阻隔空氣交(jiao)換的首要措施

③ 進(jin)入工作區(qu)(qu)域應嚴格按照單一方向進(jin)行，即(ji)：試(shi)劑儲(chu)存(cun)和(he)準備區(qu)(qu)——標本制備區(qu)(qu)——核(he)算擴增區(qu)(qu)——產物(wu)分析區(qu)(qu)

三、PCR實驗室類(lei)型

         PCR實(shi)驗室可以是分(fen)散形(xing)式(shi)，也(ye)可以是組(zu)合形(xing)式(shi)。完成(cheng)一組(zu)PCR實(shi)驗，通常應(ying)經(jing)過(guo)試劑(ji)配制、樣品(pin)處理、核酸擴(kuo)增及產物分(fen)析四個實(shi)驗過(guo)程，若實(shi)驗工藝需要，還應(ying)增加樣品(pin)粉(fen)碎過(guo)程。

①分散形式PCR實(shi)驗室：

         所謂分散形式PCR實(shi)(shi)驗(yan)室(shi)，是指完(wan)成(cheng)上述實(shi)(shi)驗(yan)過程的實(shi)(shi)驗(yan)用房彼此(ci)相距較遠，呈分散布置形式。對(dui)于這種布置形式的PCR實(shi)(shi)驗(yan)室(shi)建設設計，由于各個實(shi)(shi)驗(yan)之(zhi)間(jian)不易相互干擾，因(yin)此(ci)無需(xu)特殊條(tiao)件要求。

②組(zu)合形式PCR實驗室(shi)：

         所謂(wei)組(zu)合形(xing)式, 是(shi)指(zhi)完成(cheng)(cheng)基(ji)因擴增四個實驗過(guo)程的實驗用房(fang)相鄰布置，組(zu)成(cheng)(cheng)獨(du)立實驗區(qu)域的形(xing)式。對于(yu)組(zu)合形(xing)式PCR實驗室的建設設計(ji)，由(you)于(yu)各(ge)個實驗間集中布置，容(rong)易造成(cheng)(cheng)相互干(gan)擾，因此，對總(zong)體布局(ju)以及屏障系統具有一定的要求。各(ge)室在入口處設緩沖間，以減少室內(nei)外空氣交換。

WOL 承接 PCR檢測實驗室 無菌操作室 設計裝修

WOL 承接 PCR檢測實驗室 無菌操作室 設計裝修