建造PCR實驗室——設計建造PCR實驗室 WOL

1、建(jian)立樣品(pin)準(zhun)備區

這個區域專門用作(zuo)(zuo)樣品的準備，在制(zhi)備和操(cao)作(zuo)(zuo)用于核酸提取的試劑時應(ying)該(gai)采取預防措施

2、樣(yang)品(pin)(pin)準備(bei)和RNA-PCR RNA-PCR的(de)額外(wai)步驟需(xu)要額外(wai)的(de)樣(yang)品(pin)(pin)操作，這樣(yang)增加了樣(yang)品(pin)(pin)之間污染的(de)機(ji)會。為了避免(mian)這一問題，反轉錄(lu)一步可(ke)以(yi)(yi)在樣(yang)品(pin)(pin)準備(bei)區進(jin)行。在RNA-PCR中應(ying)用UNG以(yi)(yi)防止(zhi)污染的(de)方(fang)法也(ye)有報道。

3、建立(li)前PCR區。

該(gai)去(qu)專門用于準(zhun)備(bei)(bei)各種反應，這個區域必須保持干凈，而且沒有來自(zi)克隆和樣(yang)品準(zhun)備(bei)(bei)的污染(ran)。前(qian)PCR區必須要有試(shi)劑和準(zhun)備(bei)(bei)，特別是專門用于前(qian)PCR區的正壓活塞式移(yi)液管。

4、PCR實驗室(shi)試劑的操作(zuo)。

5、在前PCR區建立PCR混合(he)物。

6、控制污染的方法。

已設計出很有力(li)的(de)酶學方法用來消除(chu)一種形(xing)式的(de)污(wu)(wu)染-使用UNG，這(zhe)一技(ji)術能有效地消除(chu)由PCR產物引起(qi)的(de)污(wu)(wu)染。另(ling)一種控制污(wu)(wu)染的(de)方法是(shi)使用紫外線，這(zhe)種方法不能完(wan)*消除(chu)污(wu)染(ran)問題，但可以將污(wu)染(ran)降低幾個數量級。

7、后(hou)PCR區PCR完成以后(hou)，需要分析(xi)樣品(pin)并解釋數據(ju)，應該留出(chu)一(yi)個專門用于反(fan)應后(hou)處理樣品(pin)的地(di)方(fang)。后(hou)PCR活動(dong)中使用的所用試劑、一(yi)次性耗材和儀(yi)器都必須是專門用于這一(yi)目的，決不能把實(shi)驗(yan)室這一(yi)區域的試劑或儀(yi)器用于任何前(qian)PCR活動(dong)

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