PCR實驗(yan)室平面布局

原則上分為四個區域：試劑準備區、樣品制備區、擴增區和擴增產物分析區：

PCR實(shi)驗室原則上(shang)為試(shi)劑準備(bei)區(qu)(qu)(qu)、樣品(pin)制備(bei)區(qu)(qu)(qu)、擴增區(qu)(qu)(qu)和擴增產物分析區(qu)(qu)(qu)四(si)個單獨(du)的工(gong)作區(qu)(qu)(qu)域(yu)(yu)并(bing)設(she)有(you)(you)專用走(zou)廊，各工(gong)作區(qu)(qu)(qu)域(yu)(yu)應(ying)設(she)緩沖間，工(gong)作區(qu)(qu)(qu)與緩沖間宜安(an)裝連鎖裝置。不同功能的工(gong)作區(qu)(qu)(qu)應(ying)是分隔(ge)獨(du)立的，各工(gong)作區(qu)(qu)(qu)有(you)(you)明(ming)顯的標志，不能直通(tong)，如果緊密相(xiang)連，需安(an)裝物品(pin)傳遞窗。

PCR實驗室(shi)區域的(de)設置(zhi)并不(bu)是一成(cheng)不(bu)變的(de)，以下幾種情(qing)況需(xu)要說明：

1.如果樣(yang)本在擴增(zeng)之前需要(yao)粉(fen)(fen)碎(sui)處理，則需要(yao)增(zeng)加一個(ge)區域(yu)用于樣(yang)品(pin)的粉(fen)(fen)碎(sui)。

2.如果(guo)采用實時熒光(guang)PCR法，則擴增區和分(fen)析區可(ke)以合并為一(yi)個區。

3.如果采用(yong)全自動(dong)化PCR分析儀，則(ze)標本制備區(qu)、擴增(zeng)區(qu)和(he)分析區(qu)可(ke)以合并為一個(ge)區(qu)。

前兩(liang)區(qu)(qu)(qu)(qu)為(wei)(wei)擴(kuo)(kuo)(kuo)增(zeng)(zeng)(zeng)前區(qu)(qu)(qu)(qu)，后兩(liang)區(qu)(qu)(qu)(qu)為(wei)(wei)擴(kuo)(kuo)(kuo)增(zeng)(zeng)(zeng)后區(qu)(qu)(qu)(qu)，擴(kuo)(kuo)(kuo)增(zeng)(zeng)(zeng)前區(qu)(qu)(qu)(qu)與(yu)擴(kuo)(kuo)(kuo)增(zeng)(zeng)(zeng)后區(qu)(qu)(qu)(qu)應(ying)嚴格分開(kai)。實(shi)(shi)驗材料、試(shi)劑、記錄紙、筆、清潔材料等(deng)，只能從擴(kuo)(kuo)(kuo)增(zeng)(zeng)(zeng)前區(qu)(qu)(qu)(qu)流(liu)向擴(kuo)(kuo)(kuo)增(zeng)(zeng)(zeng)后區(qu)(qu)(qu)(qu)，即從試(shi)劑準備(bei)區(qu)(qu)(qu)(qu)、樣(yang)品制備(bei)區(qu)(qu)(qu)(qu)到擴(kuo)(kuo)(kuo)增(zeng)(zeng)(zeng)區(qu)(qu)(qu)(qu)和(he)擴(kuo)(kuo)(kuo)增(zeng)(zeng)(zeng)產物分析區(qu)(qu)(qu)(qu)，不得(de)逆(ni)向流(liu)動。實(shi)(shi)驗室(shi)的(de)氣流(liu)也應(ying)從擴(kuo)(kuo)(kuo)增(zeng)(zeng)(zeng)前區(qu)(qu)(qu)(qu)流(liu)向擴(kuo)(kuo)(kuo)增(zeng)(zeng)(zeng)后區(qu)(qu)(qu)(qu)，不得(de)逆(ni)向流(liu)動。各工作區(qu)(qu)(qu)(qu)頂部應(ying)安裝紫(zi)(zi)外(wai)燈，紫(zi)(zi)外(wai)燈的(de)波長為(wei)(wei)254nm，每20㎡一支40W的(de)紫(zi)(zi)外(wai)燈。

原則上的四大區域注意正壓負壓的控制：

1.試劑準備區：

主(zhu)要(yao)進(jin)行試(shi)劑的制備(bei)、分裝和主(zhu)反應(ying)混合液的制備(bei)。試(shi)劑和用于樣品制作的材料(liao)應(ying)直接運送至該區(qu)，不得經過其它區(qu)域。試(shi)劑原(yuan)材料(liao)必(bi)須貯存在(zai)本(ben)(ben)區(qu)內，并在(zai)本(ben)(ben)區(qu)內制備(bei)成(cheng)所需的試(shi)劑。本(ben)(ben)區(qu)主(zhu)要(yao)設(she)備(bei)有(you)天(tian)平、冰箱、離(li)心機、加樣器、振蕩器等。

對于(yu)氣流壓力(li)的(de)控制(zhi)，本區并沒有嚴格的(de)要求。

2.樣品制備區：

主要進行樣品的(de)保存(cun)、核酸(RNA、DNA)提取、貯存(cun)及其加入至擴(kuo)增反應(ying)管和測定DNA的(de)合成。本區主要設備有冰(bing)箱、生(sheng)物(wu)安(an)全柜、離心機、加樣器、振(zhen)蕩器、恒溫水浴等(deng)。

本區的壓力梯度要求為：相對于鄰近區域為正壓，以避免(mian)從(cong)鄰近區進入本區的氣(qi)溶膠污染。

3.擴增區：

該區(qu)(qu)域的(de)功能(neng)是(shi)DNA擴(kuo)增和(he)擴(kuo)增片段的(de)測定。此外(wai)，反(fan)應混(hun)合液(ye)(來自試(shi)劑貯存和(he)制(zhi)備區(qu)(qu))制(zhi)備成反(fan)應混(hun)合液(ye)和(he)已制(zhi)備的(de)DNA模(mo)板(來自標(biao)本(ben)(ben)制(zhi)備區(qu)(qu))的(de)加入等也可(ke)在本(ben)(ben)區(qu)(qu)內(nei)進行。對(dui)于(yu)氣流(liu)壓力的(de)控(kong)制(zhi)，相對(dui)于(yu)鄰近區(qu)(qu)域為負壓，以避免(mian)氣溶(rong)膠(jiao)從本(ben)(ben)區(qu)(qu)漏出。為避免(mian)氣溶(rong)膠(jiao)所(suo)致的(de)污染，應盡(jin)量(liang)減少在本(ben)(ben)區(qu)(qu)內(nei)不必(bi)要的(de)走動(dong)。個別操作(zuo)如加樣等應在超凈臺(tai)內(nei)進行。

該(gai)區(qu)域的(de)設備主要是核酸擴(kuo)增熱循環儀(yi)、加樣器、超(chao)凈(jing)臺等。其中熱循環儀(yi)的(de)電源應專用，并(bing)配備一(yi)個穩壓電源或UPS，以防止(zhi)由于(yu)電壓的(de)波動對擴(kuo)增測定的(de)影響主要進行DNA擴(kuo)增。

本區的壓(ya)力梯度要求為：相(xiang)對于鄰近區域為負壓(ya)，以避免氣溶膠(jiao)從本區漏出。

4.擴增產物分析區：

擴(kuo)增(zeng)產物的測定。本區主要(yao)設(she)備有酶標儀、洗板機、加(jia)樣器和水浴(yu)箱等。

本區的壓力梯(ti)度的要求為(wei)：相對(dui)于鄰近區域為(wei)負壓，以避免擴增產物從本區擴散至其(qi)它區域。

PCR無菌核酸檢測實驗室 設計裝修——PCR無菌核酸檢測實驗室 設計裝修